細(xì)胞轉(zhuǎn)染是外源基因進(jìn)入真核細(xì)胞的一種重要方法。這些外源DNA或RNA通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑的包裝輔助才能順利進(jìn)入細(xì)胞,發(fā)揮相應(yīng)的作用,進(jìn)而研究其細(xì)胞功能及相應(yīng)的影響。廣泛應(yīng)用于基因功能研究、調(diào)控基因表達(dá)、癌癥、疾病模型相關(guān)研究和重組蛋白研究等生物學(xué)試驗(yàn)。
polyscience轉(zhuǎn)染試劑聚乙烯亞胺“Max"(PEI MAX)是一種功能強(qiáng)大、值得信賴且具有成本效益的試劑,被廣泛認(rèn)為是目前體外和體內(nèi)轉(zhuǎn)染的金標(biāo)準(zhǔn)。PEI MAX具有高密度的質(zhì)子氨基,每三個(gè)原子中就有氨基氮。這在幾乎任何pH值下都具有很高的緩沖能力。因此,一旦進(jìn)入內(nèi)體,PEI MAX就會(huì)破壞液泡并將遺傳物質(zhì)釋放到細(xì)胞質(zhì)中。PEI MAX與DNA的穩(wěn)定絡(luò)合、高效進(jìn)入細(xì)胞以及逃逸內(nèi)體的能力使 PEI MAX 成為一種高效的轉(zhuǎn)染試劑,適用于多種細(xì)胞系/類型,包括在貼壁和懸浮培養(yǎng)物中生長(zhǎng)的常用的HEK293和CHO細(xì)胞。與市場(chǎng)上的其他PEI和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑相比,PEI MAX能夠在不影響細(xì)胞活力的情況下產(chǎn)生高效細(xì)胞系。下面讓我們一起來(lái)看看polysciences轉(zhuǎn)染試劑24765-1的應(yīng)用都有哪些吧!
一、基因功能研究
基因表達(dá):
通過(guò)轉(zhuǎn)染表達(dá)載體,如質(zhì)粒DNA或病毒載體,可以使目標(biāo)基因在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中得到高水平的表達(dá)。這可以用來(lái)研究基因的生物學(xué)功能,例如確定基因在信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的作用、觀察表達(dá)蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位等。
基因沉默:
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可以用于介導(dǎo)siRNA、shRNA或miRNA等小分子RNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞,來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的特定沉默。這可以研究目標(biāo)基因在細(xì)胞生理和病理過(guò)程中的功能,以及發(fā)掘潛在的治療靶點(diǎn)。
二、蛋白質(zhì)表達(dá)研究
瞬時(shí)表達(dá):
細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑可以用于導(dǎo)入外源基因或表達(dá)載體,使其在短時(shí)間內(nèi)表達(dá)蛋白質(zhì)。這種瞬時(shí)表達(dá)技術(shù)可以用于快速篩選蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能,觀察蛋白質(zhì)的定位、相互作用伙伴等。
穩(wěn)定表達(dá):
通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,可以將表達(dá)載體(如表達(dá)質(zhì)粒或病毒載體)轉(zhuǎn)染至細(xì)胞,并利用選擇壓力(如抗生素篩選)或基因整合,使目標(biāo)基因穩(wěn)定地整合到細(xì)胞基因組中。這種穩(wěn)定表達(dá)可以用于長(zhǎng)期的蛋白質(zhì)表達(dá)和功能研究,如疾病模型的建立和藥物篩選。
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